農(nóng)作物中Cry1A(c)和CP4-EPSPS轉(zhuǎn)基因成分雙重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立

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摘要：采用羧基熒光素（FAM）和六氯熒光素（HEX）熒光基團(tuán)標(biāo)記探針，建立針對(duì)農(nóng)作物中常見(jiàn)抗蟲(chóng)和抗除草劑基因的雙重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法，通過(guò)特異性、檢出限以及模擬摻假試驗(yàn)驗(yàn)證此方法在轉(zhuǎn)基因檢測(cè)中的適用性。特異性檢測(cè)試驗(yàn)中僅轉(zhuǎn)基因作物（轉(zhuǎn)基因棉花、轉(zhuǎn)基因水稻、轉(zhuǎn)基因大豆）和陽(yáng)性質(zhì)粒檢測(cè)出相應(yīng)轉(zhuǎn)基因成分，其余樣品均未出現(xiàn)明顯PCR擴(kuò)增曲線(xiàn);檢出限結(jié)果表明，雙重實(shí)時(shí)熒光PCR方法對(duì)Cry1A（c）、CP4-EPSPS基因的檢出限分別為1、0.1 ng，所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)r2值均大于0.98，具有對(duì)農(nóng)作物中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行定量檢測(cè)的能力;模擬摻假檢測(cè)顯示此方法可檢測(cè)到1%的Cry1A（c）和5%的CP4-EPSPS轉(zhuǎn)基因成分。（剩余7264字）