低劑量甲氨蝶呤聯(lián)合索拉非尼對小鼠骨肉瘤移植瘤的影響及其機(jī)制

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［摘 要］ 目的：探討低劑量甲氨蝶呤 （MTX） 聯(lián)合索拉非尼 （SFN） 對人骨肉瘤 （OS） 的抗腫瘤作用，并闡明其可能的作用機(jī)制。方法：體外培養(yǎng)4種人OS細(xì)胞 （143B細(xì)胞、HOS細(xì)胞、U2OS細(xì)胞和MG63 細(xì)胞），采用Western blotting 法測定各種細(xì)胞中的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF） 和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2 （VEGFR2） 蛋白表達(dá)水平；建立人OS 裸鼠皮下移植瘤模型，并將建模成功的20 只BABL/C 裸鼠隨機(jī)分為對照組（給予2% 二甲基亞砜+98% 玉米油）、低劑量MTX 組（給予2 mg·kg-1 MTX）、SFN 組（給予15 mg·kg-1 SFN） 和聯(lián)合用藥組（給予2 mg·kg-1 MTX+ 15 mg·kg-1SFN），每組5 只，測量各組小鼠腫瘤體積并繪制腫瘤生長曲線；HE 染色觀察4 組小鼠腫瘤組織病理形態(tài)表現(xiàn)，免疫組織化學(xué)法檢測各組小鼠腫瘤組織中VEGFR2、細(xì)胞增殖抗原Ki-67 和缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF-1） 蛋白陽性表達(dá)率； 人OS 143B 細(xì)胞分別給予0、0. 125、0. 250、0. 500、1. 000、2. 000 和4. 000 μmol·L-1 MTX 處理，CCK-8 法檢測各組143B 細(xì)胞存活率，計(jì)算半數(shù)抑制濃度（IC50），并選取對143B 細(xì)胞存活無影響的MTX 濃度作為低劑量MTX；人OS 143B 細(xì)胞分為對照組和低劑量MTX 組（給予0 和0. 250 μmol·L-1 MTX 處理）， 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA） 法檢測各組143B 細(xì)胞中VEGF水平。（剩余11365字）