傳染性法氏囊病病毒新型變異株VP2蛋白原核表達及免疫效果評價

打開文本圖片集

DOI：10.3969/j.issn.2095-1191.2023.06.029

摘要：【目的】構(gòu)建傳染性法氏囊病病毒新型變異株（vaIBDV）VP2蛋白原核表達質(zhì)粒，并明確VP2蛋白的免疫原性，為vaIBDV亞單位疫苗的開發(fā)提供技術(shù)支持?！痉椒ā繌腎BDV新型變異株（BZ）中擴增VP2基因片段，亞克隆至pET-28a（+）載體上構(gòu)建重組原核表達質(zhì)粒，并轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21（DE3）感受態(tài)細胞，以IPTG誘導(dǎo)表達后通過SDS-PAGE和Western blotting進行鑒定，并以vaIBDV陽性血清進行瓊擴效價測定；經(jīng)Ni-NTA親和層析純化及適當(dāng)濃縮后，制備乳化疫苗并免疫21日齡SPF雞，通過安全性檢驗、抗體效價測定及攻毒保護評價進一步驗證融合蛋白VP2的免疫原性。（剩余21698字）