穩(wěn)轉(zhuǎn)oHSV2主要衣殼蛋白VP5人宮頸癌細(xì)胞系的構(gòu)建

打開文本圖片集

［摘 要］ 為建立穩(wěn)定表達(dá)溶瘤Ⅱ型單純皰疹病毒主要衣殼蛋白（VP5）的人子宮頸癌HeLa-VP5細(xì)胞系，探究VP5蛋白是否調(diào)控自然殺傷細(xì)胞（NK）的細(xì)胞毒性。運用piggyBac轉(zhuǎn)座系統(tǒng)，通過lipofectamine 3000TM 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法，將 pPBDP-UL19和pSPBT質(zhì)粒轉(zhuǎn)入HeLa細(xì)胞，利用嘌呤霉素（Puro）篩選穩(wěn)定細(xì)胞株，用有限稀釋法得到單克隆細(xì)胞，利用western blot鑒定HeLa-VP5細(xì)胞系中VP5蛋白的表達(dá)，以及利用流式細(xì)胞術(shù)檢測HeLa-VP5中GFP的表達(dá)，最后實時監(jiān)測法比較改造前后細(xì)胞系的生長活性變化。（剩余13402字）