胞質(zhì)分裂作用因子4 過表達(dá)慢病毒載體的構(gòu)建和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Neuro-2a 細(xì)胞的建立

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［摘 要］ 目的：構(gòu)建胞質(zhì)分裂作用因子4（DOCK4）過表達(dá)慢病毒載體，建立DOCK4穩(wěn)定過表達(dá)的Neuro-2a細(xì)胞。方法：在美國(guó)國(guó)家生物信息中心（NCBI）查找DOCK4的序列并設(shè)計(jì)合成引物，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR） 法擴(kuò)增獲取DOCK4 基因序列，通過BamHⅠ和AgeⅠ限制性內(nèi)切酶酶切后，將其與酶切后的慢病毒載體GV492 進(jìn)行連接，構(gòu)建GV492-DOCK4 過表達(dá)重組質(zhì)粒，PCR 法鑒定篩選出與目的基因片段長(zhǎng)度大小相近的陽(yáng)性克隆。（剩余13418字）