基于酵母雙雜交技術(shù)對(duì)與納爾遜海灣正呼腸孤病毒σNS 相互作用宿主蛋白的篩選

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［摘 要］ 目的：探討小鼠成纖維L929細(xì)胞中與納爾遜海灣正呼腸孤病毒 （NBV） σNS蛋白相互作用 （互作） 的宿主蛋白，闡明宿主蛋白對(duì)病毒復(fù)制的影響。方法：構(gòu)建表達(dá) σNS蛋白的誘餌質(zhì)粒pGBKT7-S3， 采用測(cè)序技術(shù)驗(yàn)證誘餌質(zhì)粒在Y2H 酵母細(xì)胞中的準(zhǔn)確表達(dá)。將pGBKT7-S3 和pGADT7 質(zhì)粒分別和共同轉(zhuǎn)化至Y2HGold 酵母細(xì)胞中，涂布于固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，觀察菌落生長(zhǎng)情況，確認(rèn)σNS 蛋白對(duì)酵母細(xì)胞無(wú)毒性，不能自行激活報(bào)告基因。（剩余13429字）