灰飛虱VAPB蛋白的抗體制備及體內(nèi)外應(yīng)用

摘要

灰飛虱Laodelphaxstriatellus的囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白B（VAPB）是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白家族的蛋白，其主要參與調(diào)節(jié)囊泡運(yùn)輸、脂類的轉(zhuǎn)運(yùn)代謝以及未折疊蛋白應(yīng)答等。本研究克隆了灰飛虱VAPB基因，構(gòu)建了pColdSUMOVAPB原核表達(dá)載體，再將其轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞Rosetta（DE3），經(jīng)過IPTG低溫誘導(dǎo)表達(dá)得到了含有HIS和SUMO標(biāo)簽的VAPB可溶性蛋白，經(jīng)過Ni2+NTA親和層析柱純化后的蛋白再利用rTEV酶去除SUMO標(biāo)簽，得到無標(biāo)簽的VAPB蛋白。（剩余12111字）