胸腺素β4在RAW264.7巨噬細胞炎癥模型中的抗炎作用機制

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【摘要】 目的 探討胸腺素β4（Tβ4）對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的小鼠單核-巨噬細胞RAW264. 7極化趨向，以及其對炎癥反應(yīng)的影響。方法 用LPS誘導(dǎo)RAW264.7細胞建立炎癥模型。采用CCK-8法檢測細胞活力，酶聯(lián)免疫吸附法檢測細胞因子［腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）］的質(zhì)量濃度；Griess法檢測細胞培養(yǎng)上清液中一氧化氮（NO）的分泌情況；實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-qPCR）檢測核因子-κB（NF-κB）、環(huán)氧酶-2（COX-2）、

TNF-α、IL-6 mRNA表達水平；蛋白免疫印跡法檢測誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）、NF-κB、磷酸化NF-κB（p-NF-κB）、NF-κB抑制蛋白α（IκB-α）和磷酸化IκBα（p-IκB-α）蛋白水平；熒光染色雙標法觀察巨噬細胞的極化狀態(tài)；免疫熒光染色檢測NF-κB定位及表達。（剩余16720字）